實(shí)驗(yàn)室常用離心機(jī)已經(jīng)深入到各種實(shí)驗(yàn)室內(nèi)
點(diǎn)擊次數(shù):2072 更新時(shí)間:2018-10-27
實(shí)驗(yàn)室常用離心機(jī)已經(jīng)深入到各種實(shí)驗(yàn)室內(nèi)
實(shí)驗(yàn)室常用離心機(jī)可能會(huì)深入到每一個(gè)技術(shù)相關(guān)實(shí)驗(yàn)室,是一個(gè)潛伏發(fā)展的市場(chǎng),應(yīng)當(dāng)引起裝備治理方面的高度正視。在明確實(shí)驗(yàn)室的主次技術(shù)需求及相應(yīng)離心方法的條件下,大rcf、rpm、樣品量是選擇離心技術(shù)的基本參數(shù),要在此基礎(chǔ)上考慮離心機(jī)的選型、主要功能及兼顧功能的配置。
醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室常規(guī)離心技術(shù)功能需求
RNA離心制備:培養(yǎng)細(xì)胞在低速離心完成細(xì)胞分離、裂解后,加RNA沉淀提取液,于4℃,10000~12O00xg分步提取;組織樣本需先經(jīng)勻漿預(yù)處理。
DNA離心制備:水平轉(zhuǎn)頭,2000xg左右,1.5/2.0mlEppendof管,15ml、50mlFalcon管或更大體積;再經(jīng)12000~27000xg。制備質(zhì)粒DNA:角轉(zhuǎn)頭,250ml或500m1/瓶,5000-6000xg;15-50rnl/管,12000~27000xg;4℃或特定溫度。
載體表達(dá)蛋白分離:角轉(zhuǎn)頭,250~500ml/瓶,4000xg;15~50mlFalcon管,3O00xg;角轉(zhuǎn)頭,50ml管/瓶,27000xg;4℃。
細(xì)胞純化和亞細(xì)胞器分離:用差速離心法分離細(xì)胞器和大小差別懸殊的細(xì)胞。由低速分步到高速離心,細(xì)胞器的沉降順序是細(xì)胞核、線粒體、溶酶體、過氧化酶體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體、核蛋白體,所有過程控溫4℃。收集細(xì)胞:水平轉(zhuǎn)頭,850~1850xg,優(yōu)選錐形底管;分離細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì),3300xg;核提取,25O00xg。進(jìn)一步純化分離將聯(lián)用超速離心。密度梯度速率沉降法分離密度相近而大小不等的細(xì)胞或細(xì)胞器。采用合適的密度梯度介質(zhì),水平轉(zhuǎn)頭,1OOxg左右。等密度梯度法分離細(xì)胞器,10000-30O00xg。
細(xì)胞學(xué)涂片離心:通過在個(gè)別機(jī)型上配置細(xì)胞學(xué)涂片離心轉(zhuǎn)頭,實(shí)現(xiàn)一次4片離12,;據(jù)細(xì)胞學(xué)特性,rc啦制在5O~1000xg。選購時(shí)需留意離心容器的小樣品處理量。
離心超濾、濃縮、抽提:配合市售離心過濾濃縮管或樣品抽提容器使用,采用角轉(zhuǎn)頭或水平轉(zhuǎn)頭,角轉(zhuǎn)頭可使超濾膜與離心力不成直角而避免濃度極化;1000~l2O00xg不等,可參考所購容器的使用說明。
微孔板離心:酶標(biāo)板、TC板、PCR板以及樣品抽提純化板的離心,在實(shí)驗(yàn)室常用離心機(jī)可通過在大容量水平轉(zhuǎn)頭上配置微孔板吊架或選用專門離心轉(zhuǎn)頭實(shí)現(xiàn),≥1O00xg。每個(gè)吊架可放1~4塊尺度96孔板或更多。